鼻/咽拭子检测作为一种非侵入性生物样本采集方式,已成为呼吸道传染病诊断的核心技术。该方法通过采集上呼吸道黏膜细胞及分泌物,可快速检测病毒、细菌等病原体的存在,特别是在新冠肺炎、流感、百日咳等疾病筛查中发挥关键作用。相较于血液检测,其操作便捷、成本低廉且可实施大规模筛查,已成为公共卫生防控体系的重要工具。随着分子生物学技术的进步,检测灵敏度和特异性显著提升,但规范的采样流程和科学的检测标准仍是确保结果准确性的核心要素。
鼻/咽拭子的检测目标主要包括: - 病毒检测:新型冠状病毒(SARS-CoV-2)、甲/乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒等 - 细菌检测:A组链球菌、百日咳杆菌、肺炎链球菌等 - 多重病原体联合检测:通过多重PCR技术同时筛查15-22种常见呼吸道病原体 特殊场景下还可用于耐药基因检测(如mecA基因筛查MRSA)或宿主免疫反应分析。
1. 核酸检测(PCR技术) 采用实时荧光定量PCR(qPCR)或数字PCR(dPCR),通过扩增病原体特异性基因片段实现检测。灵敏度可达1-10拷贝/μL,全过程需4-6小时,包括核酸提取、扩增和数据分析环节。
2. 抗原快速检测 基于免疫层析原理,使用标记抗体捕获病原体表面蛋白。15-30分钟出结果,但灵敏度较PCR低(约80-85%),适用于早期感染筛查。
3. 测序技术 全基因组测序用于病毒变异株鉴定,宏基因组测序(mNGS)可无偏倚检测样本中全部微生物。
1. 采样规范 - 咽拭子:在咽后壁及双侧扁桃体反复擦拭3-5次 - 鼻拭子:深入鼻腔1.5-2cm旋转停留10-15秒 - 采样时间:发病3日内阳性率最高 - 保存条件:病毒运输液(VTM)中4℃保存不超过72小时
2. 实验室标准 - 核酸扩增需在生物安全二级(BSL-2)实验室进行 - 内参基因(如RNase P)CT值≤35判定样本合格 - 阳性阈值设定:新冠病毒检测ORF1ab和N基因CT值均≤40
3. 质量控制 - 每批次检测需包含阴性对照、阳性对照和环境对照 - 采用国际标准品(如WHO COVID-19 RNA标准物质)进行校准 - 实验室间比对需符合ISO 15189要求
当前主要执行标准包括《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南》(第七版)、WHO《SARS-CoV-2检测操作手册》及CLSI M54-A呼吸道标本采集指南。随着技术发展,微流控芯片技术、CRISPR快速检测等新方法正在逐步纳入标准化体系。