菌落计数检测是一种核心的微生物学定量检测方法，广泛应用于食品安全、水质监测、医药卫生、环境卫生等领域，旨在评估样品中活微生物（主要是细菌和真菌）的数量及其潜在风险。该方法基于微生物在适宜培养基上生长形成可见菌落的原理，通过标准化操作量化样品中的微生物负荷，从而为产品质量控制、卫生标准评估和污染源追溯提供科学依据。菌落计数检测不仅能帮助监控生产过程中的微生物污染水平，还能为疾病预防和公共卫生决策提供数据支持。例如，在食品工业中，它用于检测肉制品、乳制品和饮料中的细菌总数，确保产品符合安全标准；在医疗领域，则用于评估无菌操作的成效。整个检测过程强调无菌操作、环境控制和结果可重复性，是现代微生物检测体系中不可或缺的一环。
菌落计数检测的核心项目包括总菌落数测定、特定微生物计数（如大肠菌群、致病菌等）以及微生物生长趋势分析。总菌落数（Total Plate Count, TPC）是最常见的检测项目，反映样品中所有可培养的需氧细菌或真菌的总量。特定微生物计数则针对特定菌群，例如在食品安全中检测沙门氏菌或金黄色葡萄球菌的数量，或在环境样本中分析水质中的大肠杆菌。此外，检测项目还可能包括微生物生长曲线测定，用于评估微生物在不同条件下的繁殖速率。这些项目通常针对液体、半固体或固体样品设计，如食品、水样、化妆品或医疗器材表面残留物。检测结果以菌落形成单位（CFU/mL 或 CFU/g）表示，提供直观的微生物污染指数。
菌落计数检测的主要方法是平板计数法（Plate Count Method），具体步骤包括样品预处理、稀释接种、培养孵育和菌落计数。首先，样品需进行均质化处理（如搅拌或研磨），然后进行梯度稀释（通常为10倍系列稀释），以减少微生物密度至可计数范围。接着，将稀释后的样品接种到适宜的固体培养基中（如营养琼脂或MacConkey琼脂），通过倾注法或涂布法均匀分布。接种后，将培养基置于恒温培养箱中孵育（通常细菌在35-37°C、24-48小时；真菌在25-28°C、48-72小时），促进微生物生长形成可见菌落。最后，人工或自动计数器统计菌落数量，结合稀释倍数计算原始样品中的CFU值。替代方法包括膜过滤法（用于液体样品）和螺旋平板法（提高计数效率）。这些方法要求严格控制无菌操作和培养条件，以确保数据准确性。
菌落计数检测需遵循严格的国家和国际标准，以确保结果的一致性和可比性。主要标准包括ISO 4833（国际标准化组织标准，适用于食品和饲料中的菌落总数测定）、GB 4789.2（中国国家标准，针对食品微生物学检验的菌落总数测定）和USP <61>（美国药典标准，用于医药产品的微生物限值检测）。这些标准详细规定了检测流程、培养基选择、培养温度、时间以及结果报告格式。例如，ISO 4833要求使用30°C培养72小时，而GB 4789.2则指定35-37°C培养48小时。标准还界定了可接受结果范围，如食品中菌落总数的安全限值（如<10^4 CFU/g为低风险），并对异常结果（如菌落过密或重叠）提出了重新检测的规范。遵守这些标准能有效减少实验误差，提升检测的权威性和应用价值。
