硫普罗宁（Tiopronin）是一种含巯基的氨基酸衍生物，临床上广泛用于重金属中毒、肝病及胱氨酸尿症的治疗。其在体内通过肝代谢途径转化为多种代谢产物，包括硫普罗宁二硫化物、乙酰化产物以及与蛋白质结合的复合物等。由于药物的疗效、毒副作用及个体化用药需求，准确检测硫普罗宁及其代谢物的浓度具有重要意义。通过检测血液、尿液或组织样本中的原型药物及其代谢物水平，可评估药物的生物利用度、代谢动力学特征以及潜在的毒性风险，为临床用药安全性和治疗方案优化提供科学依据。
硫普罗宁检测的核心项目包括：
1. 原型硫普罗宁浓度检测
2. 主要代谢物（硫普罗宁二硫化物、N-乙酰硫普罗宁）定量分析
3. 蛋白结合型代谢物的检测
4. 游离巯基含量的测定（反映药物活性）
检测需覆盖血浆、尿液及特殊样本（如胆汁）中的目标物，重点关注药代动力学关键参数（如Cmax、Tmax、AUC）及代谢清除路径。
目前主流的分析技术包括：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：采用C18反相色谱柱，紫外检测波长设定为215-240 nm，流动相常使用磷酸盐缓冲液与乙腈梯度洗脱
2. 液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）：具有高灵敏度和特异性，可同时定量原型药物及多种代谢物，检测限可达0.1 ng/mL
3. 电化学检测法：利用巯基的氧化还原特性进行定量，适用于游离硫普罗宁检测
4. 免疫分析法：开发特异性单克隆抗体，用于快速筛查和临床即时检测
国内外主要参考标准包括：
1. 中国药典2020版化学药物质量控制指南
2. 美国药典USP-NF对硫普罗宁制剂的检测要求
3. ICH Q2(R1)分析方法验证指导原则
方法验证需满足以下指标：
- 线性范围：0.1-50 μg/mL（血浆样本）
- 精密度（RSD≤15%）
- 准确度（回收率85-115%）
- 最低定量限（LLOQ≤1 ng/mL）
实验过程需严格进行质控，包括内标物（如N-乙酰半胱氨酸）校准、基质效应评估及稳定性验证。
