二氧化碳（CO₂）是人体内重要的代谢产物之一，其浓度变化与呼吸功能、酸碱平衡及肾脏调节功能密切相关。在临床检验中，血液或体液中的CO₂浓度测定是评估患者酸碱状态、呼吸衰竭及代谢性疾病的关键指标。近年来，基于磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（Phosphoenolpyruvate Carboxylase, PEPC）酶法的二氧化碳测定试剂盒因其高灵敏度、特异性和操作便捷性，逐渐成为实验室的优选方法。该试剂盒通过酶促反应将样本中的CO₂转化为可检测产物，结合分光光度法或电极法实现定量分析，广泛应用于急诊科、重症监护室及常规生化检测中。
二氧化碳测定试剂盒（PEPC酶法）主要用于检测血清、血浆或全血样本中的总二氧化碳（TCO₂）含量，包括溶解的CO₂、碳酸氢盐（HCO₃⁻）及碳酸盐（CO₃²⁻）等形式。其检测项目覆盖以下临床应用：
1. 酸碱平衡紊乱的诊断与监测（如代谢性酸中毒/碱中毒、呼吸性酸中毒/碱中毒）；
2. 慢性阻塞性肺疾病（COPD）、肾功能不全患者的病情评估；
3. 围术期患者及危重症患者的呼吸功能监护；
4. 儿科、新生儿科中先天代谢性疾病的筛查。
PEPC酶法的核心原理是通过两步酶促反应将CO₂转化为草酰乙酸，并伴随NADH的消耗，通过测定340nm波长下吸光度的变化计算CO₂浓度。具体步骤如下：
1. 样本前处理：采集静脉血后，立即分离血清或血浆，避免溶血和长时间暴露于空气中；
2. 试剂配制：按说明书将缓冲液、PEPC酶、苹果酸脱氢酶（MDH）及NADH混合；
3. 反应体系建立：取样本与试剂按比例加入比色杯，混匀后孵育至反应完全；
4. 吸光度测定：使用分光光度计记录反应前后340nm处吸光度的差值；
5. 结果计算：通过标准曲线或公式（ΔA×K）得出CO₂浓度，单位通常为mmol/L。
为确保检测结果的准确性，需遵循以下标准与质控要求：
1. 参考范围：成人血清TCO₂正常值为22-32mmol/L，儿童略低；
2. 线性范围：试剂盒通常覆盖5-50mmol/L，超出范围需稀释后重测；
3. 精密度要求：批内CV≤3%，批间CV≤5%；
4. 干扰因素控制：避免脂血、黄疸样本（血红蛋白＞5g/L时需校正）；
5. 标准物质：使用NIST可溯源校准品，定期验证仪器性能；
6. 质控规则：依据CLSI EP15-A3文件，每日运行两个浓度质控品，采用Westgard多规则判读。
此外，实验室需定期参与CAP或CNAS组织的室间质评，确保检测体系符合ISO 15189认证要求。
