传染性造血器官坏死病（Infectious Hematopoietic Necrosis, IHN）是一种由传染性造血器官坏死病毒（IHNV）引起的急性、高致死性鱼类病毒性疾病，主要危害鲑鳟鱼类（如虹鳟、大西洋鲑等）。该病可通过水体、病鱼排泄物、卵及精液传播，具有发病急、死亡率高（可达90%以上）的特点，对水产养殖业造成严重经济损失。IHN的典型症状包括体表出血、腹部膨大、眼球突出及肝脏、肾脏等造血器官坏死。由于早期症状易与其他鱼类疾病混淆，实验室检测成为确诊和防控的关键手段。
针对IHN的检测需覆盖病原鉴定、病毒载量分析及感染状态评估，主要包括以下项目：
1. 病毒分离与鉴定：通过采集病鱼的肾脏、脾脏或卵巢液样本，接种敏感细胞系（如CHSE-214或EPC细胞）进行病毒培养，观察细胞病变效应（CPE）以初步判断是否存在IHNV感染。
2. 分子生物学检测：利用RT-PCR、实时荧光定量PCR（qPCR）或环介导等温扩增（LAMP）技术检测病毒核酸，可快速、灵敏地识别IHNV的特异性基因片段（如G蛋白基因或N蛋白基因）。
3. 血清学检测：通过酶联免疫吸附试验（ELISA）或中和试验检测鱼体内特异性抗体，用于流行病学调查和群体免疫状态评估。
4. 组织病理学检查：对患病鱼类的造血组织（如肾脏、脾脏）进行切片染色，观察细胞坏死、嗜酸性包涵体等特征性病变。
不同检测方法适用于不同场景，需根据目的选择：
1. 病毒分离法：将样本处理后接种至细胞培养瓶，在15-20℃培养7-14天，定期观察CPE（如细胞圆缩、脱落）。阳性结果需通过免疫荧光（IF）或PCR进一步验证。此方法特异性高，但耗时较长。
2. RT-PCR检测：提取样本RNA后，采用针对IHNV保守区域（如N基因）的引物进行反转录扩增。常规RT-PCR可检测病毒存在，qPCR可定量分析病毒载量，灵敏度可达10^1-10^2拷贝/μL。
3. 免疫学快速检测：胶体金试纸条或ELISA试剂盒可在30分钟内完成现场检测，适用于养殖场的初步筛查，但需注意与其他弹状病毒的交叉反应风险。
国内外对IHN检测制定了严格的技术规范：
1. OIE标准：世界动物卫生组织（OIE）《水生动物疾病诊断手册》规定，确诊需满足病毒分离阳性且PCR/测序确认，或组织病理学结合特异性核酸检测结果。
2. 国家标准：中国《GB/T 15805.2-2018 鱼类检疫规程 第2部分：传染性造血器官坏死病（IHN）》明确要求采用细胞培养结合RT-PCR的方法进行检测，并对样本采集、保存和运输条件作出详细规定。
3. 行业规范：水产养殖企业需执行《NY/T 564-2018 鱼类疫病检测技术规范》，定期开展抗体监测和病原筛查，阳性样本需上报并启动隔离消毒程序。
以上标准均强调实验操作的生物安全要求，检测实验室需具备BSL-2级防护资质，防止病毒扩散。
