猪传染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia, PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)引起的一种高度接触性呼吸道传染病。该病以急性出血性肺炎、慢性纤维素性胸膜炎和呼吸困难为特征,具有发病急、死亡率高、传播快的特点,对全球养猪业造成重大经济损失。随着规模化养殖的发展,该病的防控需求日益迫切,而精准的检测技术、规范的检测项目及标准是有效防控的核心基础。
猪传染性胸膜肺炎的检测需围绕病原体、抗体及病理变化展开,具体包括以下核心项目:
1. 病原体检测:通过采集病猪的肺组织、鼻腔拭子或血液样本,直接检测APP的存在,是确诊的“金标准”。
2. 抗体检测:利用血清学方法检测猪群中特异性抗体水平,评估感染状态及疫苗免疫效果。
3. 病理学检查:观察肺脏的出血、坏死及胸膜粘连等典型病变,结合组织切片染色确认病原定植情况。
1. PCR检测技术:基于APP的基因序列设计特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增病原DNA,具有灵敏度高、特异性强的特点,适用于早期诊断和亚临床感染筛查。
2. ELISA方法:采用酶联免疫吸附试验检测血清中的APP抗体,可区分自然感染与疫苗免疫抗体,适用于群体流行病学调查。
3. 细菌分离培养:将样本接种于含NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的巧克力琼脂培养基,通过菌落形态、生化试验及血清型分型鉴定APP,但耗时长且对实验室条件要求较高。
4. 病理组织学检查:通过H&E染色观察肺组织炎性细胞浸润、出血坏死等病变,结合免疫组化技术定位APP抗原。
1. 国家标准:中国《GB/T 27537-2011 动物源性产品中胸膜肺炎放线杆菌检测方法》明确了PCR和细菌分离的操作流程及判定标准。
2. OIE标准:世界动物卫生组织(OIE)《陆生动物诊断与疫苗手册》规定了APP的诊断方法、样本处理及结果解释的国际化指南。
3. 欧盟标准:强调对APP血清型的分子分型(如Apx毒素基因检测),以指导疫苗选择及跨境贸易检疫。
4. 行业规范:规模化猪场需定期开展血清学监测(每季度1次),抗体阳性率超过15%时需启动病原学排查。
通过以上检测项目、方法及标准的系统应用,可有效实现猪传染性胸膜肺炎的早期预警、精准诊断和科学防控,为保障生猪健康养殖提供技术支撑。