马流产沙门氏菌病(Equine Abortive Salmonellosis)是由马流产沙门氏菌(Salmonella abortus equi)引起的马属动物急性传染病,以妊娠母马流产为主要特征,对养马业造成严重经济损失。该病原体可通过消化道、呼吸道或交配传播,感染后潜伏期可达数周至数月,临床表现为高热、流产、胎盘滞留及新生幼驹败血症等。由于该病具有高传染性和潜在公共卫生风险,及时、精准的实验室检测对疫病防控至关重要。
针对马流产沙门氏菌病的实验室检测主要包括以下核心项目:
1. 病原学检测:通过细菌分离培养鉴定病原体,是诊断的金标准;
2. 血清学检测:检测特异性抗体(如凝集试验、ELISA)以判断感染状态;
3. 分子生物学检测:通过PCR技术扩增沙门氏菌特异性基因(如invA基因);
4. 组织病理学检查:观察流产胎盘及胎儿脏器的病理变化。
1. 细菌培养与分离:
采集流产胎儿胃内容物、胎盘组织或母马阴道分泌物,接种于选择性培养基(如SS琼脂、XLD琼脂),37℃培养24-48小时后观察典型菌落形态,通过生化试验(三糖铁试验、赖氨酸脱羧酶试验)和血清学凝集试验(O抗原鉴定)确认。
2. 聚合酶链式反应(PCR):
使用特异性引物扩增沙门氏菌保守序列,如:
- invA基因(沙门氏菌侵袭因子基因)
- sefA基因(菌毛结构基因)
实时荧光定量PCR可提高检测灵敏度和定量分析能力。
3. 酶联免疫吸附试验(ELISA):
检测血清中抗LPS(脂多糖)IgM和IgG抗体水平,双抗原夹心法具有较高特异性。急性期抗体效价≥1:160或恢复期效价上升4倍具有诊断意义。
依据国内外相关技术规范执行检测:
1. OIE标准:《陆生动物诊断试验手册》第3.9.10章规定分离培养阳性或PCR检测Ct值≤35为确诊依据;
2. 国家标准:GB/T 14926.8-2001《实验动物 沙门氏菌检测方法》规范样本前处理及检测流程;
3. 生物安全要求:按BSL-2级实验室标准操作,菌株保存需符合《病原微生物菌(毒)种保藏管理办法》。
检测报告需包含样本信息、检测方法、结果判定依据及生物风险评估,阳性样本需在24小时内上报动物疫病控制中心。定期开展实验室间比对试验,确保检测结果符合CNAS-CL02认可准则要求。