致突变试验检测是评估化学物质、药物或环境污染物对遗传物质潜在危害的关键手段，其核心目标在于识别可能引发基因突变、染色体畸变或DNA损伤的风险因子。随着全球对化学品安全性和药物毒理研究的重视，该检测已成为药物研发、工业品注册及环境风险评估中不可或缺的环节。检测项目主要涵盖基因突变、染色体结构异常、DNA修复机制干扰三大方向，而检测方法则根据作用机制和生物模型差异，形成了微生物试验、哺乳动物细胞试验、体内动物模型三大技术体系。
Ames试验（细菌回复突变试验）作为经典检测方法，利用组氨酸缺陷型沙门氏菌株，通过观察化学物质诱导的回复突变率变化评估致突变风险。该方法具有成本低、周期短（48-72小时）、灵敏度高等特点，可检测碱基置换、移码突变等DNA损伤类型。实验需设置5个标准菌株（TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535），并同步进行代谢活化（S9混合液）与非活化条件下的平行测试。
微核试验通过检测细胞分裂后期滞留在胞质中的染色体断片，评估染色体断裂或纺锤体损伤。体外试验多采用中国仓鼠卵巢细胞（CHO）或人淋巴细胞，体内试验则选用啮齿类动物骨髓或外周血样本。改良的流式细胞术微核检测可实现高通量分析，检测灵敏度提升3-5倍。实验需设置至少3个浓度梯度，并保证最高剂量组细胞存活率≥50%。
单细胞凝胶电泳（彗星试验）通过电场作用下DNA碎片迁移形成"彗星尾"，定量评估DNA单/双链断裂程度。该方法可检测0.1-10 Gy剂量范围的损伤，适用于体内外多种细胞类型。自动化图像分析系统可将传统72小时的手动操作缩短至4小时，变异系数控制在15%以内。实验需严格把控细胞裂解时间（4℃下2-24小时）和电泳条件（25V，300mA，20分钟）。
转基因动物模型（如MutaMouse、Big Blue）通过基因靶向技术将报告基因整合至基因组，可精确量化体内器官特异性突变频率。以λ噬菌体载体系统为例，其检测灵敏度达1×10^-6突变/碱基，较传统方法提升2个数量级。全基因组测序技术的应用使突变谱分析分辨率达到单核苷酸水平，但需配套生物信息学分析平台处理TB级数据。
当前致突变检测正朝着高通量、高内涵方向发展，OECD 489指南推荐的体外微核流式检测法，可在96孔板中实现每日5000样本的处理能力。检测方法的组合应用（如Ames试验+体外微核试验+体内染色体畸变试验）可满足ICH S2(R1)三级评估要求，使假阴性率控制在5%以下。随着类器官模型和器官芯片技术的突破，未来检测体系将更贴近人体真实生理环境。
