阿胶作为传统中药瑰宝，其原料驴皮来源的纯正性直接关系到产品品质与用药安全。近年来，由于驴皮资源紧缺，市场上频繁出现使用骆驼皮、牛皮、马皮等低价原料非法替代的现象。针对阿胶中骆驼源性、牛源性及马源性成分的检测，已成为药品监管、生产质控和消费者权益保护的核心环节。本文系统梳理了三大动物源性成分的关键检测技术，重点解析分子生物学与蛋白质组学方法的创新应用，为阿胶真伪鉴别提供科学依据。
检测项目：特异性DNA序列检测、特征性蛋白质鉴定
检测方法：
1. 实时荧光定量PCR法：通过设计骆驼线粒体细胞色素b基因特异性引物，采用TaqMan探针检测体系，检测限可达0.1%；
2. 蛋白质质谱分析：基于骆驼胶原蛋白特征肽段（如m/z 1124.6），建立多反应监测模式；
3. ELISA法：使用抗骆驼IgG单克隆抗体进行免疫检测，适合大批量样品初筛。
检测项目：牛特异性基因片段检测、血清白蛋白分析
检测方法：
1. 多重PCR技术：同时扩增牛线粒体D-loop区和12S rRNA基因，双重验证提高准确性；
2. 液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）：检测牛源特征肽段β-casein（f135-144）；
3. 免疫层析试纸条：基于牛免疫球蛋白G开发的快速检测装置，15分钟可视化结果。
检测项目：马属特异性DNA标记物、物种特征蛋白质组
检测方法：
1. 数字PCR技术：定量检测马线粒体ND5基因，绝对定量精度达0.01%；
2. 红外光谱指纹图谱：建立马皮胶原蛋白特征吸收峰数据库（1720 cm⁻¹酰胺I带）；
3. 肽质量指纹图谱：通过MALDI-TOF MS检测马源特征肽m/z 1543.8。
现行检测体系呈现多技术融合趋势：分子生物学方法（PCR系列）具有高特异性，适用于原料筛查；质谱技术可同时检测多物种成分，满足深度鉴别需求；免疫学方法则更适合现场快速检测。根据《中国药典》规定，阿胶检测需采用至少两种不同原理的方法进行交叉验证，其中DNA条形码技术已被列为强制性检测项目。
随着二代测序、生物传感器等新技术的应用，动物源性成分检测正向痕量检测（0.01%检出限）、多靶点同步分析方向发展。建立覆盖原料采购、生产加工、成品检验的全链条检测体系，是维护阿胶道地性、保障中医药国际声誉的重要技术支撑。
