甲睾酮（Methyltestosterone）作为一种人工合成的雄性激素类药物，在医疗领域主要用于治疗男性性腺功能减退、骨质疏松等疾病。然而，由于其具有显著的蛋白质同化作用，常被滥用于竞技体育兴奋剂或健美领域，可能引发肝功能损伤、内分泌紊乱等严重副作用。因此，甲睾酮检测在反兴奋剂监管、临床用药监测和法医毒理学中具有重要意义。检测过程需要结合不同生物样本特点，选择精准的分析方法，并依据国际通行的技术标准进行质量控制。
1. 血液检测：通过测定血清/血浆中的游离甲睾酮浓度，评估近期药物暴露情况，适用于竞技体育赛前筛查和临床用药监测。
2. 尿液检测：检测药物原型及代谢产物（如17α-甲基睾酮），可反映72小时内的药物使用，是世界反兴奋剂机构（WADA）的主要检测方式。
3. 毛发检测：分析毛干中蓄积的药物成分，能追溯长达3-6个月的用药史，常用于长期用药监控和法医学调查。
1. 高效液相色谱法（HPLC）：
- 检测限（LOD）可达0.1 ng/mL
- 采用紫外检测器（UV）或二极管阵列检测器（DAD）
- 适用于批量样本的初筛检测
2. 液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）：
- 灵敏度提升至0.01 ng/mL
- 可同时检测甲睾酮及其5种主要代谢物
- 通过同位素内标法定量，准确度达95%以上
3. 免疫分析法（ELISA）：
- 快速筛查试剂盒检测时间＜30分钟
- 适用于现场初筛，但需质谱法确认结果
1. WADA技术文件：
- 《禁用清单国际标准》规定甲睾酮为S1类禁用物质
- 要求检测实验室通过ISO 17025认证
- 确认检测的定量下限（LLOQ）≤5 ng/mL
2. 临床实验室标准：
- CLIA'88要求检测系统总误差＜20%
- 建议采用同位素稀释质谱法（ID-LC/MS）作为参考方法
3. 方法验证要求：
- 精密度：日内/日间CV＜15%
- 回收率：85%-115%
- 特异性：需排除双氢睾酮、脱氢表雄酮等结构类似物的干扰
当前检测技术已实现从ng级到pg级的检测能力突破，但面对新型衍生物的挑战，检测机构需持续优化前处理流程（如固相萃取、衍生化反应）并建立更完善的标准物质库。未来基于人工智能的质谱数据分析系统，有望进一步提升复杂生物基质中痕量甲睾酮的检测效率。
