哥伦比亚血琼脂基础培养基（Columbia Blood Agar Base）是一种广泛应用于临床微生物学和实验室研究的营养丰富培养基，特别适合培养苛养菌（如链球菌、肺炎链球菌等）和常规细菌的分离。其主要成分包括胰酶消化物、肉膏、酵母提取物、玉米淀粉及氯化钠，添加5%-10%脱纤维羊血后可形成完整的哥伦比亚血琼脂培养基。这种培养基在提供基础营养的同时，还能通过溶血反应帮助鉴别细菌的溶血特性（α、β或γ溶血）。为确保培养基的质量和检测结果的可靠性，必须对其理化性质、无菌性及性能进行系统检测。
哥伦比亚血琼脂基础培养基的核心检测项目包括：
1. 物理化学检测：pH值、色泽、溶解均匀性及凝胶强度；
2. 无菌性检测：验证培养基灭菌后的无菌状态；
3. 生长支持能力：对目标菌株（如肺炎链球菌ATCC 49619、金黄色葡萄球菌ATCC 25923）的促生长效果；
4. 溶血反应鉴别：观察β-溶血性链球菌的溶血环清晰度；
5. 有效期验证：开封后及配置后的储存稳定性。
1. 理化检测：
- 使用精密pH计测量25℃下的pH值，标准范围应为7.2±0.2；
- 加热溶解后观察培养基是否均匀无颗粒，冷却后检查凝胶是否平整无裂缝。
2. 无菌性测试：
- 将灭菌后的培养基置于35°C培养箱中孵育48小时，确认无微生物污染。
3. 生长性能测试：
- 采用划线法或点种法接种标准菌株，37°C培养18-24小时后观察菌落形态和密度。
4. 溶血试验：
- 接种β-溶血性链球菌后，观察是否形成透明溶血环（β溶血）或部分溶血（α溶血）。
哥伦比亚血琼脂基础培养基需满足以下国际标准：
- ISO 11133:2014：培养基制备、储存及性能评估规范；
- CLSI M22-A3：临床实验室培养基质量控制标准；
- 中国药典2020版：规定pH值范围7.2-7.6，凝胶强度≥1000g/cm²；
- 生长性能要求：目标菌落直径≥1mm，溶血环边缘清晰度需达到阳性对照的90%以上。
通过上述系统检测，可确保哥伦比亚血琼脂基础培养基在临床诊断和科研实验中的准确性，为微生物分离鉴定提供可靠支持。
